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实时定量PCR检测Kif2amRNA在男性精液中的表达

安徽医科大学学报 2013 11 v.48 1387-1390     字体:

基金项目: 云南省应用基础研究计划项目内设研究机构科研项目(编号:2009NS006);; 人力资源和社会保障部资助项目(编号:[2009]416)

作者:周浩;董云华;孙杨;李红玲;沈涛;严新民;

关键词:不育;;精液RNA;;实时定量PCR;;Kif2a

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.11.026

〔摘 要〕 目的检测驱动蛋白重链成员2A(Kif2a)在男性精液中的表达,探讨Kif2a在不育男性精液中表达的意义。方法收集72例新鲜精液样本液化,经过离心等预处理后用TRIzol试剂提取精液RNA并逆转录成cDNA。运用实时荧光定量PCR检测精液中总Kif2a mRNA的量,并选取管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为内参对照。样本依据精液临床检测指标分为异常组和正常组。结果实时定量PCR法检测所得结果显示Kif2a mRNA存在于人类精液中。对Kif2a mRNA进行相对定量分析显示,在精子存活率、精子密度、精子活动率(a+b+c级精子)方面,异常组中Kif2a mRNA的表达量较正常组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结合Kif2a在男性异常和正常精液中的差异性表达,其在精子的生成和受孕方面是否存在潜在的影响值得进一步探索。