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人FKBP3在哺乳动物细胞系中的转染表达与定位

安徽医科大学学报 2013 05 v.48 558-561     字体:

基金项目: 安徽省教育厅自然科学重点科研项目(编号:KJ2010A187);; 安徽省自然科学基金项目(编号:11040606M170、11040606M164)

作者:龚芮;潘林鑫;张姗靖;耿慧武;刘晓颖;范礼斌;

关键词:FKBP3;;基因表达;;细胞定位;;免疫荧光

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.05.030

〔摘 要〕 以含cDNA序列的质粒为模板,下游引物带有FLAG标签,PCR扩增,插入pcDNA3.1,成功构建C端带FLAG标签的人野生型肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP3的哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1-FKBP3-FLAG。转染HEK 293T细胞,Western blot检测;转染COS-7细胞,荧光显微镜观察。FKBP3在HEK 293T、COS-7细胞中均有表达,且定位在COS-7细胞的细胞质和细胞核,胞质分布较多,为进一步研究FKBP3的相互作用蛋白和功能奠定了一定的基础。