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特异性标记胚胎干细胞分化的成血管细胞

安徽医科大学学报 2013 05 v.48 545-549     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81172591);; 安徽省教育厅课题(编号:KJ20108372);; 安徽医科大学博士学术科研活动资助项目(编号:XJ200801)

作者:李春;周诗君;翟志敏;周海胜;

关键词:胚胎干细胞;;成血管细胞;;造血细胞;;细胞分化;;细胞标记

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.05.026

〔摘 要〕 克隆小鼠flk1基因启动子和增强子,构建成血管细胞特异性表达GFP载体,并转染小鼠胚胎干细胞(ES)。将ES分化形成胚胎体(EB),观察EB中GFP表达,收集第4天的EB细胞进行流式细胞分析和分选,以获得GFP+细胞进行血细胞集落形成实验,以确定GFP标记细胞造血分化潜能。结果显示,成功构建成血管细胞特异性表达GFP载体;转染的ES形成的EB中可见绿色荧光细胞。流式细胞分析结果发现,转基因组EB中的GFP+细胞(27.5%)与对照组EB中FLK1+细胞(28.1%)比较差异无统计学意义;GFP+和FLK1+细胞形成集落数比较差异无统计学意义。表明对ES分化产生的成血管细胞实现了特异性标记,为后续研究ES体外造血分化的分子机制奠定了基础。