基金项目: 国家自然科学基金(编号:U1903118);;兵团重点领域科技攻关计划项目(编号:2018AB019)
作者:冯真;张博;邓思齐;叶国敏;张辉;张万江;吴江东;李卫民;
关键词:肺结核;;外泌体;;miR-26a-5p;;miR-151a-3p;;验证
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.12.022
〔摘 要〕 目的研究miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病血浆外泌体中的表达差异性及其诊断价值。方法通过生物信息学网站筛选结核病外泌体中具有差异性表达的miRNAs(miR-26a-5p和miR-151a-3p)。再以70例结核病患者(结核病组),58例体检健康者(健康对照组)样本进行临床验证:采用差速离心法提取血浆外泌体,透射电子显微镜,粒径分析,Western blot对其鉴定,采用RT-qPCR检测血浆外泌体中miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病组和对照组中的表达水平,并通过ROC曲线评价二者在结核病中诊断价值。结果透射电镜、粒径分析、Western blot鉴定到典型的外泌体特性,即成功提取到血浆外泌体。在临床验证中,以内参和外参同时校准,结核组患者血浆外泌体中miR-26a-5p表达水平低于对照组(P<0.000 1),结核组患者血浆外泌体中miR-151a-3p表达水平高于对照组(P<0.000 1),与生物信息学结果一致。作为诊断标记,以内参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.709,两者联合诊断结核病的AUC为0.915(P<0.000 1);以外参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的AUC分别为0.829、0.854,两者联合诊断结核病的AUC为0.911 (P<0.000 1)。结论结核患者血浆外泌体来源miR-26a-5p表达水平降低,miR-151a-3p表达水平升高,且两者临床诊断效能较高,可能是诊断结核病潜在的生物标志物。