〔摘　要〕 目的比较两种常用的前列腺癌细胞系PC3及LNCaP与小细胞神经内分泌细胞癌(SCNC)及前列腺腺癌的相关性及特点。对5 000个广泛使用的小分子进行筛查实验,去发现能够同Rad001协同诱导前列腺癌细胞细胞毒性的一些化合物;探讨其同Rad001协同抗前列腺癌的分子机制。方法建立前列腺癌LNCaP及PC3细胞的同种异体动物移植模型,同人类前列腺腺癌及SCNC之间,使用免疫组化及Western blot法对相关关键信号分子的表达情况进行比较。使用Chou TC的模型去验证Propa-chlor同Rad001协同抗前列腺癌的效应,运用流式细胞术对协同时引起凋亡的细胞比例进行定量,Western blot的方法对凋亡及自体吞噬时重要的分子表达情况进行了比较。同时使用免疫荧光、电镜的方法检测自体吞噬时的形态变化。建立前列腺癌PC3细胞同种异体移植的小鼠模型,验证联合使用Rad001和Propachlor协同抑制肿瘤生长的效应。结果 LNCaP细胞表达雄激素受体(AR)及前列腺特异性抗原(PSA)分子,同时当雄激素撤退时,LNCaP细胞的生长受到了抑制,这点同人类前列腺腺癌十分相似。PC3细胞不表达AR及PSA分子其生长不受雄激素的影响,这点同人类的SCNC十分相似。前列腺腺癌细胞及LNCaP细胞的神经内分泌及干细胞相关的标记物(CD44)均为阴性;而SCNC及PC3则均为阳性。LNCaP细胞同前列腺腺癌细胞一样有着相似的细胞骨架成分;而PC3细胞同SCNC一样有着相似的细胞骨架成分。当前列腺癌PC3及C4-2细胞接受了Rad001和Propachlor的联合处理后,会引起更为显著的细胞毒效应;同时联合处理后绝大多数的联合治疗指数(CI)<0.9。联合使用Rad001和Propachlor具有显著的协同效应。同时当PC3及C4-2接受了Rad001和Propachlor的联合处理后,凋亡细胞的比例同接受单一Rad001或Propachlor处理相比明显增加。自体吞噬途径中相关蛋白LC3-2、Atg5-Atg12、Beclin1的表达明显增加;同样电镜及荧光显微镜下自噬小体的表达明显增加;Beclin1 mRNA的转录活性明显增强。同样在前列腺癌细胞PC3小鼠的异体移植动物模型中,联合使用Rad001及Propachlor也能协同抑制肿瘤的生长。结论 LNCaP细胞具有前列腺腺癌的特点;而PC3细胞具有前列腺小细胞癌的特点。联合使用两种化合物Rad001和Propachlor可以协同导致两种激素非依赖性前列腺癌细胞(PC3及C4-2细胞,对传统去势治疗耐受的前列腺癌细胞)的死亡。该研究发现了一种新的化合物Propachlor能够同已知的化合物Rad001在体外、体内水平协同抗前列腺癌,且诱导自体吞噬可以做为一种新颖的治疗前列腺癌的方案。