基金项目: 北京市科技新星计划(编号:Z191100001119140)
作者:邵笑;魏从文;闵敏;董瑞华;
关键词:RNF43;;PTEN;;AGS;;泛素化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.11.014
〔摘 要〕 目的 研究E3泛素连接酶环指蛋白43(RNF43)在人胃腺癌细胞AGS中新的作用靶点及其对AGS凋亡、增殖与迁移的影响。方法 使用荧光显微镜观察RNF43在人胃腺癌细胞AGS中的瞬时转染效率;使用Western blot研究高表达RNF43对AGS磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达水平的影响;采用免疫共沉淀实验研究RNF43与PTEN的相互作用及RNF43对PTEN的泛素化修饰;分别用流式细胞实验、CCK-8实验、细胞划痕实验研究RNF43通过调控PTEN的表达对AGS细胞凋亡、增殖、迁移能力的影响。结果 细胞荧光结果显示,外源RNF43成功在人胃腺癌细胞AGS中过表达;RNF43与PTEN在AGS中存在相互作用,RNF43可以通过K63形式的泛素化方式对PTEN进行泛素化修饰并增加PTEN的蛋白表达水平。细胞功能实验结果显示RNF43可以通过靶向调控PTEN的功能水平进而加速AGS的凋亡并抑制AGS的增殖与迁移。结论 RNF43可以通过对PTEN的泛素化修饰来抑制人胃癌细胞AGS的增殖与迁移。