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新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定

安徽医科大学学报 2012 05 v.47 504-507     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:30901606,81072127);; 安徽省自然科学基金(编号:11040606M176)

作者:刘然;冯定庆;宣恒华;凌斌;

关键词:卵泡膜干细胞;;卵巢;;培养;;鉴定;;分化

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2012.05.005

〔摘 要〕 目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2~4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免疫荧光法检测干细胞标记物碱性磷酸酶(AKP)、Oct4、膜细胞标记物Gli3与颗粒细胞标记物FSHR的表达;体外诱导分化,RT-PCR法检测分化标记物Gli2,油红O染色后观察。结果 GSM-K中培养2 d形成细胞球;Ptch1、AKP、Oct4和Gli3表达阳性,不表达Zp1、Zp2、Zp3和FSHR;诱导分化后,Gli2表达,油红O染色阳性。结论新生鼠卵巢组织中存在卵泡膜干细胞,且具有分化潜能。