基金项目: 河北省自然科学基金(编号：H2021209026);;河北省人力资源和社会保障厅项目(编号：C20210340);;河北省省级科技计划(编号：213777115D);;河北省财政厅项目(编号：冀财预复[2020]397号)
作者：张荣花;张亚楠;韩向阳;崔笑妍;田晓丽;章广玲;刘志勇;
关键词：LX-2;;丝氨酸/苏氨酸激酶3;;miR-22-3p;;miR-29a-3p;;增殖;;迁移
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.07.012
〔摘 要〕 目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)能否逆转miR-22-3p/29a-3p对人肝星状细胞LX-2活化的协同抑制作用。方法 利用TargetScan、Starbase、miRDB和DIANA预测miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因，对筛选出的靶基因进行KEGG、GO和蛋白-蛋白互作(PPI)分析；RNAhybrid分析候选靶基因与两个miRNAs结合的自由能，并通过双萤光素酶报告实验确定它们的靶向关系；采用CCK-8、Transwell和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LX-2细胞增殖、迁移以及纤维化标志物的表达。结果 miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因有24个，且它们富集在与肝纤维化相关的信号通路和生物学过程；候选靶基因AKT3与miR-22-3p和miR-29a-3p的结合自由能分析结合双萤光素酶实验结果提示AKT3是miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因；miR-22-3p和miR-29a-3p mimics能够单独或协同抑制LX-2细胞的增殖、迁移以及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原α1链(COL1A1)mRNA的表达(P