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可共表达骨保护素和碱性成纤维生长因子的复制缺陷型重组腺病毒

安徽医科大学学报 2009 05 v.44 538-542     字体:

基金项目: 常州市社会发展科技计划基金(编号:CS2006212)

作者:张梅;曹寅;何金生;王麟;刘思逸;

关键词:骨保护素;;成纤维细胞生长因子2;;质粒;;牙周疾病

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2009.05.002

〔摘 要〕 目的构建共表达骨保护素(OPG)和碱性成纤维生长因子(FGF2)基因的复制缺陷型重组腺病毒,为应用基因工程技术联合组织工程技术治疗牙周病的研究打下基础。方法以双表达质粒pIRES-OPG-FGF2为基础,构建含OPG和FGF2两种基因的双顺反子腺病毒穿梭质粒pSC/OPG-I-FGF2,通过与AdEasy腺病毒系统中的腺病毒骨架质粒进行同源重组获得可共表达两种基因的双顺反子复制缺陷型重组腺病毒质粒,经限制性内切酶线性化,转染复制缺陷型重组腺病毒DNA分子至293细胞。结果293细胞出现典型病变,RT-PCR鉴定OPG和FGF2基因有转录,W esternb lot显示可表达目的蛋白OPG和FGF2。结论成功获得一株可共表达两种目的基因的双顺反子复制缺陷型重组腺病毒FGAd/OPG-I-FGF2。