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新型基因载体巯基烷基化壳聚糖的制备及体外性质的初步研究

安徽医科大学学报 2009 02 v.44 162-167     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:50573073);; 安徽省自然科学基金项目(编号:070413090)

作者:白欣;慕卿;李树宝;张梅;何金生;方月娥;汪春兰;赵宇;

关键词:遗传载体;;壳聚糖;;转染

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2009.02.006

〔摘 要〕 目的制备巯基烷基化壳聚糖(TACS)载基因纳米粒,并对其体外相关性质进行初步研究。方法复凝聚法制备TACS/pDNA复合纳米粒子,并用透射电镜对其的形态和粒径进行观察和表征;凝胶阻滞分析观察其对基因的保护情况;以Lipofectamine 2000转染试剂作为阳性对照,检测其对人胚胎肾细胞(HEK293)的转染活性;四噻氮唑盐(MTT)比色法测定其对细胞活性的影响。结果TACS/pDNA复合纳米粒子形态不很均一,粒径在390nm左右;凝胶阻滞分析证明了载体能有效地包裹和保护基因不受DNaseⅠ酶的消化;体外基因转染实验证实了TACS纳米粒子能够有效地转染HEK293,其转染效率远高于壳聚糖纳米粒子,略低于脂质体;MTT测定其对细胞活力影响甚微,对细胞的毒性明显低于脂质体。结论TACS有望成为一种有价值的新型基因载体。