安徽医科大学学报
2009 02 v.44 150-153
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基金项目: 国家自然科学创新群体基金资助项目(编号:30621063);; 国家高新技术研究发展计划(863计划)资助项目(编号:2006AA02A310);; 国家重点基础研究发展规划(973计划)资助项目(编号:2006CB910802);; 安徽省人才开发基金资助项目(编号:2002Z035)
作者：姚景辉;姚景辉;王建;王晓辉;黄晓碧;黄晓碧;杨晓明;汪思应;
关键词：NF-κB;;基因表达
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2009.02.003
〔摘 要〕 目的构建人细胞角蛋白18(CK18)真核表达载体,以研究CK18与NF-κB信号通路的关系。方法经PCR扩增CK18基因片段,用pCMV-Myc及pDsRed1-N1载体构建真核重组质粒,瞬时转染HEK293细胞,用Western blot方法检测pCMV-Myc-CK18的表达,在荧光显微镜下观察pD-sRed1-N1-CK18的定位情况。用双荧光素酶报告基因系统,检测CK18对NF-κB信号通路的影响。结果构建了人CK18真核表达载体,发现CK18定位于细胞质,并抑制NF-κB的转录活性。结论构建了人CK18真核表达载体,CK18负调控NF-κB信号通路。