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3种方法检测HCMV先天性感染对老年小鼠大脑皮质细胞凋亡的比较

安徽医科大学学报 2007 02 157-160     字体:

基金项目: 教育部科学技术研究重点项目(编号:01052);; 安徽省“十五”生物医药重大科技专项(编号:01303003);; 安徽省教育厅自然科学基金项目(编号:2006KJ320B)

作者:赵俊;王明丽;陈敬贤;

关键词:巨细胞病毒感染;;细胞凋亡;;流式细胞术;;显微镜检查,电子,透射

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2007.02.011

〔摘 要〕 目的分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和透射电镜3种细胞凋亡检测方法的优缺点。方法在已建立的HCMV先天性感染小鼠中枢神经系统模型基础上,选用鼠龄为24个月模型鼠进行试验。试验分为3组(每组6只)HCMV先天性潜伏感染老年小鼠组(A组)、HCMV先天性潜伏再激活感染老年小鼠组(B组)和正常对照老年小鼠组(C组)。采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况,采用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化。结果TUNEL法和流式细胞术检测发现C组凋亡细胞最少,A组凋亡细胞比率较C组有所升高,而B组凋亡细胞最多;检测结果经T检验分析发现A组、B组与C组各组间凋亡率差异均有显著性。透射电镜检测发现,同C组比较,A组和B组部分神经元细胞核染色体固缩,核物质碎片化,凋亡小体形成等特征性凋亡改变。结论HCMV先天性感染可致老年小鼠大脑皮质细胞凋亡。TUNEL法和流式细胞术可用于凋亡的定量检测,但TUNEL法易受主观因素的影响,而透射电镜是凋亡定性检测的可靠方法。