安徽医科大学学报
2006 01 10-12
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基金项目: 安徽省人才开发基金资助(编号:2002Z035)
作者:唐晓明;杨俊涛;王清明;汪思应;
关键词:抗体,细菌;;细菌噬菌体/免疫学;;免疫球蛋白类,重链;;聚合酶链反应
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2006.01.004
〔摘 要〕 目的探讨新式SOEPCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用。方法通过引物设计的改变,将6种人VH基因和11种人VL基因利用两步法直接互相两两连接为人scFv基因,并且与传统的SOE法进行对比。scFv基因用于构建噬菌体单链抗体库。结果新式SOEPCR法成功的将6种人VH基因和11种人VL基因连接成66种不同的人scFv基因,与传统的SOEPCR法相比,效率高且方法简便,经过约130次电转化后,抗体库的总库容为5·58×109。结论成功地改进了传统的SOEPCR方法,高效组装了66种不同的人scFv基因,提高了抗体库的多样性。