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制备脱细胞真皮基质的实验研究

安徽医科大学学报 2005 01 20-22     字体:

基金项目: 安徽省教育厅项目(编号: 2003kj210)

作者:方林森,王春华,胡德林,余又新,刘晟,汪昌荣

关键词:真皮;;细胞外基质;;基底膜;;胶原纤维

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2005.01.007

〔摘 要〕  目的 采用高渗盐 -胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质(Acellulardermalmatrix,ADM)并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机制。方法 SD大鼠4只,分别麻醉后以 8%硫化钠溶液脱去躯干部皮毛,常规消毒铺巾,切取大鼠背部全层皮肤制成厚约 0 4mm的中厚皮, 1mol/LNaCl溶液 37℃浸泡 48h分离表真皮,以 0 25%胰蛋白酶+0 1%乙二酸二乙胺 (EDTA)溶液 37℃分别热消化 60、70、80、90min脱去细胞成分,并进行冷冻干燥处理。ADM作光镜、电镜观察和微生物学检测并比较分析每只大鼠不同时间消化处理的ADM的差别和不同大鼠经相同处理得到的ADM的差别。结果 消化时间不同的ADM均具有柔软、一定的柔韧性和伸展性、弹性好、弯曲不断裂的特点,组织学观察见表皮细胞均完全去除,但是消化 90min,ADM的基底膜(Basementmembranecomplex,BMC)和胶原纤维的结构与排列有不同程度的破坏;消化 60、70min的ADM虽然基底膜和胶原纤维的结构与排列正常存在,但脱细胞不完全;消化 80min制备的ADM组织学检查基底膜完整连续,胶原纤维、弹力纤维结构及排列完整规则,没有细胞成分存在。不同SD大鼠经同样的处理所得的ADM一般形状和组织学没有明显差别。微生物学检测没有细菌生长。结论 采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质