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肿瘤相关巨噬细胞及其分泌的CXCL1对肝癌细胞系Huh7生物学行为的影响

安徽医科大学学报 2023 03 v.58 398-404     字体:

基金项目: 安徽高等学校自然科学研究项目(编号:KJ2017A825);;安徽省自然科学基金项目(编号:1808085MH270、2008085QH406)

作者:赵慧咏;魏昇;杨茗皓;郭子成;刘永凡;崔笑;

关键词:肝癌;;肿瘤相关巨噬细胞;;肿瘤微环境;;CXCL1;;上皮细胞-间充质转化

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.03.009

〔摘 要〕 目的 探索巨噬细胞在肝癌炎症微环境中通过炎症趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1)调控肝癌细胞系Huh7进展。方法 筛选肿瘤临床数据库TISIDB,分析CXCL1与肝癌患者预后的关系。免疫组化、免疫荧光染色验证肿瘤巨噬细胞与CXCL1的关系。通过佛波酯(PMA)诱导人单核细胞(THP-1)获得未分化的巨噬细胞(M0),建立与肝癌细胞共培养模型,实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞表型的改变;细胞克隆形成实验、台盼蓝细胞活率检测肝癌细胞的增殖能力;肝癌细胞的迁移及侵袭能力使用Transwell实验检测;肝癌细胞Huh7中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达水平使用蛋白印迹法检测;酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测细胞培养液中目标蛋白的表达。结果 CXCL1高表达与肝癌患者不良预后有关,并且高表达CXCL1的肝癌组织具有更多的巨噬细胞富集。在巨噬细胞-肝癌细胞共培养模型中,两种细胞CXCL1的表达水平及共培养液中CXCL1浓度均增加。巨噬细胞M2型标志物CD163、CD206 mRNA表达水平升高。肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及侵袭能力增强。结论 巨噬细胞-肝癌细胞共培养增加肿瘤相关巨噬细胞CXCL1表达,促进肝癌细胞系Huh7进展。