〔摘　要〕 目的　构建含有大鼠 β NGF基因的重组腺病毒载体并观察其在星形胶质细胞的表达 ,为下一步在动物体内进行中枢损伤的基因治疗提供基础。方法　设计一对含有HindⅢ及SalⅠ酶切位点的 β NGF基因上下游引物 ,PCR法扩增含有大鼠 β NGFcDNA的质粒pUC19 β NGF ,产物经HindⅢ及SalⅠ双酶切 ,插入腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV ,获得重组质粒pAdTrack β NGF ,经PmeⅠ酶线性化后 ,与腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1共同转入BJ5 183中进行同源重组 ,重组子经卡那霉素抗性筛选及酶切分析 ,阳性克隆经 2 93细胞包装 ,扩增 ,空斑法测定病毒滴度 ,转化体外培养的星形胶质细胞。通过RT PCR、ELISA、Westernblot法检测其在星形胶质细胞中的表达。结果　PCR及酶切鉴定确认获得重组腺病毒载体 pAd β NGF ,重组腺病毒在 2 93细胞中包装成功 ,病毒滴度达 2× 10 11PFU/ml。病毒上清液经ELISA检测 ,β NGF表达的量为 (94 5 0± 4 5 8)ng/L。 结论　该重组腺病毒载体的构建为下一步在动物体内的表达及中枢神经系统损伤的转基因治疗提供了一定的基础。