安徽医科大学学报
2004 03 189-191
字体:大 中 小
基金项目: 安徽省卫生厅科研基金资助 (编号 :2 0 0 2A0 0 8);; 安徽省省自然科学基金资助 (编号 :0 3 0 43 719)
作者:佘其美,王长江,王佑民,代芳
关键词:DNA;;质粒;;限制酶图谱法
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.03.007
〔摘 要〕 目的 构建重组人脂联素 (ADPN)真核表达质粒 ,为进一步研究ADPN的功能提供实验基础。方法 应用限制性内切酶双酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18 T和真核表达质粒pcDNA 3 1+ ,回收目的基因片段与线性化的真核表达质粒 ,经连接、转化大肠杆菌JM10 9,筛选阳性克隆 ,经酶切和核苷酸序列测定鉴定。结果 重组真核表达质粒经HindⅢ、EcoRⅠ酶切后获得 5 4kb和 80 0bp两个片段 ,大小与理论值一致 ,并经核苷酸序列测定证实。结论 成功地构建了人重组脂联素真核表达质粒。