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重组人类神经元14-3-3-zeta信号蛋白的纯化及抗体制备

安徽医科大学学报 2004 03 186-189     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金课题 (编号 :9843 63 2 9)

作者:胡敏,李锋,沈继龙

关键词:神经原/免疫学;;抗体,单克隆/分离和提纯

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.03.006

〔摘 要〕 目的 制备抗人脑 14 3 3zeta蛋白 (31ku)的多克隆抗体与单克隆抗体 ,为神经系统退行性疾病的诊断提供标志物。方法 用纯化的rh14 3 3zeta蛋白免疫家兔 ,制备抗 14 3 3多克隆抗血清 ;电洗脱、透析纯化rh 14 3 3/ β 半乳糖苷酶融合蛋白 ,免疫BALB/c小鼠 ,用杂交瘤技术制备抗rh 14 3 3zeta单克隆抗体 ;测定所得抗体效价及其特异性反应。结果 得到大量纯化的表达产物 ;制备的多克隆抗血清双扩效价达 1∶8~ 1∶6 4 ;获得 1株能稳定分泌抗rh 14 3 3zeta单抗的杂交瘤细胞株 ,其亚型为IgG1型 ,该株单抗可与重组14 3 3蛋白发生特异性反应。结论 获得了敏感、特异的抗rh 14 3 3zeta多克隆抗血清及稳定分泌抗rh 14 3 3zeta单抗的杂交瘤细胞株 ,为神经系统退行性疾病提供诊断标记。