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从Hep-2细胞克隆hVEGF165/VEGF121基因及序列分析

安徽医科大学学报 2004 03 182-185     字体:

基金项目: 安徽省科技厅自然科学基金资助项目 (编号 :0 3 0 2 3 0 5 6)

作者:王帮河,汪春兰,何金生,赵宇,汪红俊,曹东升

关键词:喉肿瘤;;癌,鳞状细胞;;内皮生长因子;;克隆,分子;;序列分析,DNA

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.03.005

〔摘 要〕 目的 从Hep 2 (喉鳞癌细胞 )克隆hVEGF16 5、hVEGF12 1cDNA并重组到克隆载体中 ,用于下一步构建表达VEGF 16 5、VEGF 12 1的腺病毒载体。方法 设计和合成引物 ,提取Hep 2细胞的总mRNA ,进行逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR) ,扩增出两个目的cDNA ,并将其重组到pGEM TEasy载体中送测序。 结果 从Hep 2细胞的总mRNA中反转录扩增得到 5 88bp和 4 5 6bp的片段 ,经重组送测序证实两基因分别与GenBank中的 [GI:1990 90 6 4 ]及[GI :6 6 310 2 8]提供序列完全一致。结论 从Hep 2细胞我们成功获得VEGF16 5、VEGF12 1的cDNA并构建其克隆载体可供进一步研究。