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人过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定

安徽医科大学学报 2004 06 426-428     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金项目 (编号 0 10 43 70 7)

作者:代芳,王佑民,王长江,佘其美,周剑,时照明,胡红琳

关键词:克隆,分子;;DNA,重组;;过氧化物酶类/遗传学;;真核细胞

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.06.005

〔摘 要〕 目的 克隆人过氧化物酶体增殖体激活受体γ2 (hPPARγ2 )基因及构建其真核表达重组体 ,为进一步研究该基因打下基础。方法 采用RT PCR方法从中国人网膜脂肪垫总RNA中扩增出hPPARγ2cDNA全长基因 ,将全长hPPARγ2cDRA定向插入真核表达载体pcDNA3 1(+)中 ,筛选出阳性克隆。通过限制性内切酶酶切和核苷酸序列测定进行鉴定。结果 克隆出全长hPPARγ2cDNA序列与GeneBanK序列相同 ,真核表达质粒经限制性内切酶酶切后获得的片段大小与理论值一致。结论 成功地克隆了hPPARγ2cDNA ,并构建了真核表达重组体。