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乳鼠嗅球及皮层神经元的原代培养和Netrin-4受体在神经元定位的初步研究

安徽医科大学学报 2004 06 422-425     字体:

基金项目: 国家海外青年学者合作研究基金项目(30128010);; 国家自然科学基金项目(39900041);; 北京市自然科学基金(7002030);; 安徽省人才开发基金(2002Z035)联合资助

作者:余科科,张成岗,汪思应

关键词:嗅球;;神经元;;受体,神经生长因子类

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2004.06.004

〔摘 要〕 目的 培养原代嗅球及皮层神经元细胞 ,研究神经轴突生长诱向因子 (Netrin 4 )受体在神经元细胞中的定位。方法 改良Koh法分离、培养出生 12h内Wistar乳鼠的嗅球及皮层神经元 ,采用免疫细胞化学方法鉴定其纯度。碱性磷酸酶 (AP)标记的Netrin 4融合蛋白与原代培养第 7d的神经元孵育 ,以亲和细胞化学法检测Netrin 4受体在神经元的定位。结果 原代培养第 7d的嗅球及皮层神经元胞体饱满 ,突起长并交织成网状 ;免疫细胞化学染色见神经丝蛋白(neurofilament)在神经元胞体及突起中表达 ;嗅球及皮层神经元的细胞膜上均有Netrin 4受体表达。结论 建立起高效、稳定的原代神经元培养方法并应用于神经突起生长诱向因子受体的定位研究。