〔摘　要〕 目的　构建人骨桥蛋白 (hOPN)表达载体 ,体外表达及表达产物的纯化。方法　培养人脐静脉内皮细胞 ,提取总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,以此cDNA为模板经PCR合成插入片段 ,连接至载体 pGEX 6P 1,转化到XL1 blue中进行诱导表达。表达产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳后 ,切下目的蛋白进行洗脱纯化。结果　构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA测序 ,证明所构建的质粒是 pGEX 6P OPN。SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳发现该重组质粒经IPTG诱导后表达一种新的蛋白 (表达量为 16 7% ) ,这种蛋白不存在于诱导后的pGEX 6P 1表达产物中 ,纯化后蛋白纯度为 99%。结论　成功构建了hOPN表达载体 ,并进行体外表达。