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用大引物PCR法获得轮状病毒VP4基因的突变体

安徽医科大学学报 2002 01 8-10     字体:

基金项目: 国家 8 6 3计划生物和现代农业技术领域资助项目 (编号 :2 0 0 1AA2 15 0 11)

作者:何金生,王健伟,董京芳,温乐英,洪涛

关键词:聚合酶链反应;;基因,病毒;;轮状病毒属

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2002.01.004

〔摘 要〕 目的 对A组轮状病毒主要结构抗原VP4基因中PacⅠ的识别序列进行无义突变以便于用腺病毒Ad Easy载体系统进行表达。方法 采用大引物PCR方法 ,通过 3条引物 ,两轮PCR反应 ,获得VP4基因的突变体 ,并经核酸序列分析证实。结果 PacⅠ识别的 8个碱基序列TTAAT TAA ,突变为CTGATCAA。结论 大引物PCR是对核酸进行突变的一种简便、快速的方法