基金项目: 国家自然科学基金(编号:81600568)
作者:谢姗;徐兴欣;
关键词:糖尿病肾病;;巨噬细胞;;汉黄芩苷;;KLF4
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.003
〔摘 要〕 目的 探究汉黄芩苷(WG)对高糖刺激下RAW264.7巨噬细胞的KLF4/NF-κB信号通路的影响。方法培养RAW264.7巨噬细胞,CCK-8法检测WG对细胞无活性影响的浓度范围。将细胞随机分为LG组(5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、D组(30 mmol/L甘露醇培养基)、HG组(30 mmol/L葡萄糖培养基)、LG+WG50组(5.5 mmol/L葡萄糖+50μmol/L WG)、HG+WG12.5组(30 mmol/L葡萄糖+12.5μmol/L WG)、HG+WG25组(30 mmol/L葡萄糖+25μmol/L WG)、HG+WG50组(30 mmol/L葡萄糖+50μmol/L WG);免疫荧光检测各组细胞iNOS的表达,Western blot检测各组细胞NF-κB p65、NF-κB pp65、KLF4、iNOS、IL-1β、TNF-α蛋白表达,qRT-PCR检测各组细胞KLF4、iNOS、TNF-α、IL-1β的mRNA表达量,ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β的分泌水平。结果与LG组相比,HG组细胞中iNOS表达高(P<0.01),与HG组相比,HG+W50组细胞中iNOS表达降低(P<0.01)。与LG组相比,高糖可以抑制KLF4的表达(P<0.01),上调NF-κB pp65、iNOS、IL-1β、TNF-α的表达(P<0.01),增加上清液中IL-1β、TNF-α的水平(P<0.01);与HG组相比,WG组各炎症指标明显下降(P<0.01),KLF4的表达量反而剂量依赖性增高(P<0.01)。结论WG可以抑制高糖刺激巨噬细胞分泌炎症因子及相关蛋白的表达,有提高保护性因子KLF4的治疗作用。