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5-磷酸核糖醇转移酶fukutin抑制HeLa细胞中α-dystroglycan的分泌

安徽医科大学学报 2022 10 v.57 1640-1645     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金项目(编号:11040606M170);;安徽医科大学双肩挑干部学术恢复科研专项(编号:0112011109)

作者:周恒;乔兵;李彩红;李强;朱昉修;范礼斌;

关键词:FKTN;;细胞周期;;凋亡;;迁移;;分泌

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.023

〔摘 要〕 目的 探究5-磷酸核糖醇转移酶fukutin(FKTN)对HeLa细胞周期、凋亡、迁移以及α抗肌萎缩相关糖蛋白(α-DG)分泌的影响。方法 构建质粒pcDNA3.1-α-DAG-HA,将pcDNA3.1-FKTN-3xFlag转染至HeLa细胞,提取总蛋白,Western blot法检测FKTN的过表达;过表达FKTN后利用流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况;过表达FKTN后,采用细胞划痕实验检测细胞迁移速率,使用麦胚凝集素琼脂糖珠(WGA-agarose)富集培养液中的α-DG,然后进行Western blot检测。结果 成功构建pcDNA3.1-α-DAG-HA真核表达质粒;FKTN在HeLa细胞中可过表达;过表达FKTN后与对照组相比,实验组细胞周期S期百分比下降(P0.05);过表达FKTN后与对照组相比,实验组细胞迁移速率无变化(P>0.05),α-DG分泌量减少。结论 过表达FKTN阻滞HeLa细胞周期,抑制α-DG分泌,但对细胞凋亡、迁移无影响。