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氢醌对L-02肝细胞自噬的影响

安徽医科大学学报 2022 09 v.57 1425-1430     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81960599、81460504、81260434、81060241)

作者:郑作兵;张伟;熊亮;刘婷婷;吴杨娜;杨嘉辉;胡恭华;

关键词:氢醌;;肝细胞;;自噬

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.09.016

〔摘 要〕 目的 研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞自噬的影响。方法 用不同浓度HQ(0、10、20、40和80μmol/L)处理L-02细胞24 h后,采用透射电镜观察自噬体形成;采用mCheery-GFP-LC3B融合蛋白示踪自噬体形成;采用Western blot实验检测自噬标志蛋白LC3、Beclin-1、P62的表达;采用免疫荧光实验检测自噬蛋白LC3、Beclin-1、P62的亚细胞定位及表达。结果 透射电镜下,观察到HQ作用后L-02细胞自噬体和溶酶体增多。荧光显微镜下,GFP-LC3B点状黄色斑点数量随HQ剂量增加而增多,而红色片状斑点减少。Western blot结果显示,HQ提高L-02细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的比值水平,各处理组与对照组差异均有统计学意义(P0.05)。免疫荧光实验结果显示,LC3和Beclin-1在L-02细胞的胞核和胞质中均有表达,HQ对L-02细胞内LC3和Beclin-1的亚细胞定位未产生影响,而40、80μmol/L的HQ则可诱导L-02细胞内的P62由胞质向胞核转位。结论 HQ诱导L-02细胞的自噬体增多,可能与其导致的自噬体清除障碍有关。