〔摘　要〕 目的 建立一种优化的方法，从老年大鼠脑组织中分离纯化小胶质细胞，并对小胶质细胞表面表型进行流式鉴定。方法 以年轻大鼠(3月龄)为对照，采用IV型胶原酶联合机械消化的方式制备老年大鼠脑组织单细胞悬液，用30%-37%-70%Percoll分离液分离纯化小胶质细胞，并对细胞进行荧光标记，通过流式细胞术检测老年大鼠脑组织的小胶质细胞表型。结果 采用IV型胶原酶联合机械消化，并结合密度梯度离心的方法，可以获得更多数量的单细胞，且细胞存活率均大于90%。流式检测结果显示：与年轻大鼠相比，老年大鼠脑组织M1型小胶质细胞表面标志物CD86和MHC II表达均增多(P<0.01),M2型小胶质细胞表面标志物CD200R表达也增多(P<0.01)。结论 采用IV型胶原酶联合机械消化，并结合密度梯度离心分离，是较好的分离纯化成年和老年大鼠脑组织小胶质细胞的方法。