基金项目: 湖南省卫生健康委科研立项课题(编号:202103100054)
作者:李梅;蒋锦梅;欧大明;黄丽芳;谢立虎;张济;
关键词:类风湿关节炎;;滑膜成纤维细胞;;lncRNA CASC2;;miR-218-5p;;炎症反应;;迁移与侵袭
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.08.010
〔摘 要〕 目的 探讨长链非编码RNA肿瘤易感候选基因2(CASC2)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞炎症反应、迁移及侵袭的影响及其机制。方法收集45例RA患者滑膜组织和18例健康对照者滑膜组织,采用qRT-PCR检测滑膜组织中CASC2和miR-218-5p的表达水平。ENCORI在线软件预测和双荧光素酶报告实验分析CASC2和miR-218-5p的靶向相互作用。将CASC2过表达质粒及miR-218-5p mimic转染至人RA滑膜成纤维细胞系MH7A中,qRT-PCR检测细胞中CASC2和miR-218-5p表达水平;CCK-8检测细胞的增殖水平;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测基质金属酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平。结果RA患者滑膜组织中CASC2表达水平较健康对照者滑膜组织减少(P<0.05),而miR-218-5p表达水平则增加(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,CASC2与miR-218-5p之间存在靶向调控关系。过表达CASC2可抑制RA滑膜成纤维细胞MH7A的增殖活性,降低细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,减弱细胞迁移及侵袭能力,下调细胞中miR-218-5p及MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。然而,转染miR-218-5p mimic可逆转CASC2过表达对MH7A细胞增殖、迁移与侵袭及炎症反应的抑制作用。结论CASC2在RA患者滑膜组织中低表达,其过表达可抑制RA滑膜成纤维细胞炎症反应及迁移与侵袭能力,其作用机制可能与靶向负调节miR-218-5p表达相关。