基金项目: 湖北省卫生健康委员会联合基金(编号:WJ2019H374)
作者:吴伟;程龙;王杰;杨传蕾;尚玉强;
关键词:CTGF;;血管钙化;;OPG/RANK/RANKL信号通路
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.08.015
〔摘 要〕 目的 探究结缔组织生长因子(CTGF)在主动脉血管钙化过程中的作用和机制。方法体外培养大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7r5)进行血管钙化模型构建,通过茜素红染色结果确定最佳钙化时间。细胞转染CTGF-siRNA质粒,采用RT-PCR和Western blot检测细胞中CTGF的表达量。为确定CTGF对细胞钙化的作用,将细胞随机分为7组。采用茜素红染色观察CTGF对A7r5细胞钙化的影响,采用ELISA法检测A7r5细胞中碱性磷酸酶(ALP)的活性变化,采用RT-PCR测定A7r5细胞中OPG、RANK和RANKL的表达情况。结果A7r5的最佳钙化时间为48 h。与对照组相比,CTGF-siRNA组细胞中CTGF的表达量降低,说明细胞成功转染CTGF-siRNA质粒。与模型组比较,CTGF-siRNA组A7r5细胞中的钙化结节表达量减少,ALP的活性降低(P<0.05),OPG、RANK和RANKL的表达也下调(P<0.05)。结论沉默CTGF能够减少高磷高钙所诱导的A7r5细胞钙化和降低ALP的活性,调控OPG/RANK/RANKL信号通路,从而在主动脉血管钙化中的发挥作用。