基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82170236); 安徽省重点研究与开发计划项目(编号:202104j07020037);
作者:林丽婵;刘芷言;刘震宇;刘鹏;毛遂;张云森;胡宪文;李锐;陶辉
关键词:SIRT2;心肌成纤维细胞;AngⅡ;增殖;迁移;心肌纤维化;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.04.001
〔摘 要〕 目的 探讨去乙酰化酶2(SIRT2)在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激下对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与迁移的作用。方法 对1~2d内的C57BL/6乳鼠心脏进行无菌摘取,碎化为组织匀浆、消化、过滤后提取分离的CFs。CFs贴壁生长至70%~80%汇合度后,加入AngⅡ诱导构建体外CFs活化增殖模型,AngⅡ刺激24h后分别向各组CFs转染空载质粒及SIRT2过表达质粒,后继续培养1~2d。应用RT-qPCR方法检测SIRT2、增殖细胞核抗原(PCNA)、骨膜素(POSTN)和Ⅰ型胶原A1(Col1A1)的mRNA相对表达量;Westernblot方法探测SIRT2、PCNA、POSTN和Col1A1的蛋白相对表达量;CCK-8法与EdU法探测CFs增殖活力;Transwell实验检测CFs迁移能力。结果 与CFs空白对照组相比,AngⅡ导致CFs的SIRT2表达量减少与细胞外基质蛋白表达增多,同时CFs的活化增殖明显增高。使用质粒过表达SIRT2上调AngⅡ诱导环境下CFs SIRT2表达后,与空载组相比,过表达组SIRT2表达上调,胶原纤维蛋白表达量降低,同时CFs的增殖与活化明显减少。结论过表达SIRT2能抑制AngⅡ诱导的胶原纤维沉积与CFs活化增殖,SIRT2通过调节AngⅡ诱导环境下CFs活化与增殖,也为心肌纤维化的干预与治疗提供了新的思路。