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LONP1在肝细胞癌中的表达及其对肝细胞癌发生发展的影响

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号82120108012、81930086); 安徽省临床医学研究转化专项立项项目(编号202204295107020008); 安徽省高校科研项目(编号2022AH010070); 安徽省优秀青年基金项目(编号2408085 Y041);

作者:白一鹏;徐登球;孙倍成

关键词:LONP1;肝细胞癌;凋亡;线粒体;转录组测序;慢病毒感染;

DOI:

〔摘 要〕 目的 探究线粒体Lon蛋白酶1(LONP1)在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及其对HCC发生发展的影响。方法 利用实时定量PCR(qPCR)和免疫印迹实验检测人体肝癌组织中LONP1表达情况。构建LONP1稳定敲降Hep3B和HCCLM3细胞系,通过CCK-8、EdU实验和平板克隆实验探究LONP1对肝癌细胞系细胞增殖的影响。通过细胞划痕和细胞迁移实验探究LONP1对肝癌细胞系迁移的影响。利用Cre-Loxp系统构建肝细胞LONP1条件敲除小鼠,小鼠肝脏组织送转录组测序探究LONP1缺失对肝细胞的影响。利用Tunel染色以及Annexin V-FITC/Pl流式分析探究LONP1对肝癌细胞系细胞凋亡的影响。结果 人肝脏组织的免疫印迹和qPCR实验验证了LONP1在肝癌组织中高表达。平板克隆实验结果显示,LONP1敲降的细胞克隆形成数目较对照组明显减少(P<0.01)。CCK-8和EdU染色实验结果显示,LONP1敲降的细胞增殖速度低于对照组(P <0.01)。细胞划痕实验和细胞侵袭实验结果显示,LONP1敲降的肝癌细胞系细胞迁移能力明显小于对照组细胞(P<0.01)。LONP1条件敲除小鼠肝脏组织转录组结果提示LONP1会影响肝细胞凋亡通路。Tunel染色以及Annexin V-FITC/P1流式分析结果显示LONP1敲降肝癌细胞发生更多细胞凋亡。结论 LONP1在肝细胞癌组织中高表达,在肝癌细胞系中敲降LONP1会促进细胞凋亡,并对细胞增殖和迁移能力有抑制作用。