〔摘　要〕 目的 探讨磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)过表达对小鼠原代心脏成纤维细胞自噬的影响。方法 购入1～3 d小鼠乳鼠,行手术对心脏取材,消化后分离心脏成纤维细胞进行培养。细胞贴壁生长后使用雷帕霉素(Rapa)刺激构建心脏成纤维细胞自噬模型,模型构建成功后,向细胞转染PTEN过表达质粒(PTEN过表达组)和空载质粒(空载组),培养24～48 h。通过Western blot、RT-qPCR的方法在分子层面对PTEN、自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)、苄青素1 (Beclin1)和纤维化标志物胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)的表达进行检测;通过mCherry-GFP-LC3荧光染色测定自噬过程,检测心脏成纤维细胞自噬活性的变化。最后,通过透射电镜观察心脏成纤维细胞自噬体的变化。结果 在Rapa刺激构建的心脏成纤维细胞自噬模型中,相较于对照组,模型组的PTEN蛋白及mRNA水平下降(P <0.05),自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1和纤维化标志物CollagenⅠ蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。另外,过表达组心脏成纤维细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1和CollagenⅠ蛋白及mRNA的表达水平相较于空载组下降(P <0.05)。mCherry-GFP-LC3荧光染色实验表明,PTEN过表达组心脏成纤维细胞自噬活性较空载组明显下降(P<0.05)。透射电镜结果表明,PTEN过表达组心脏成纤维细胞自噬体较空载组减少(P<0.05)。结论 过表达PTEN能够抑制心脏成纤维细胞的自噬,提示PTEN可能是参与调控心脏成纤维细胞自噬的关键基因。