基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82473059); 安徽医科大学研究生科研与实践创新项目(编号:YJS20230103);
作者:裴娅婷;沈玉婷;王菊琴;罗文武;郭欠影;吴正升
关键词:乳腺癌;PHB2;免疫组化;迁移;侵袭;EMT;
DOI:
〔摘 要〕 目的 探讨抗增殖蛋白2(PHB2)在乳腺癌中的表达及其对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法 采用免疫组化检测乳腺癌组织中PHB2蛋白的表达并分析其与临床病理特征的关系。分别构建敲低和过表达PHB2的乳腺癌稳转细胞系,通过克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验检测PHB2对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。运用蛋白质印迹实验(WB)检测PHB2对上皮间质转化(EMT)相关标志物钙粘蛋白E(E-cadherin)、钙粘蛋白N(N-cadherin)、蜗牛家族转录抑制因子1(Snail)蛋白、波形蛋白(Vimentin)和紧密连接蛋白1 (Claudin-1)表达的影响。裸鼠皮下成瘤实验检测PHB2对体内成瘤能力的影响。结果 免疫组化结果显示,PHB2在乳腺癌中高表达并且与肿瘤大小、人表皮生长因子受体-2(HER-2)和增殖指数Ki-67显著正相关(均P <0.05)。克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验结果显示,敲低PHB2可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01);过表达PHB2则促进其增殖、迁移和侵袭(P<0.01)。裸鼠皮下成瘤实验结果显示,敲低PHB2小鼠的肿瘤体积和体质量明显减小(P<0.0001),过表达PHB2肿瘤的体积和体质量明显增加(P <0.001)。WB结果显示,敲低PHB2后乳腺癌细胞的上皮标志物E-cadherin上调,而间充质标志物N-cadherin、Snail、Vimentin下调(P <0.01);过表达PHB2后乳腺癌细胞的Claudin-1下调,而N-cadherin、Snail、Vimentin上调(均P<0.05)。结论 PHB2在乳腺癌中高表达并能够促进肿瘤细胞的多种恶性生物学行为,可能是乳腺癌诊断和治疗的潜在靶点。