基金项目: 安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2021zhyx-C18);安徽省自然科学基金项目(编号:1908085MH270);
作者:牛耕辰;王俊;张悦;尹艳艳
关键词:皮质酮;脂多糖;小胶质细胞;鸡豆黄素A;活性氧;NLRP3炎症小体;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 探讨皮质酮(CORT)预处理对脂多糖(LPS)激活小胶质细胞的调节作用及鸡豆黄素A(Bio A)对小胶质细胞活化的抑制作用。方法 用MTT法筛选出LPS、CORT和Bio A对BV2细胞的最适浓度;将BV2细胞分为5组: Control组、CORT(50 nmol/L)组、LPS(1 μg/mL)组、LPS(1 μg/mL)+ CORT(50 nmol/L)组、LPS(1 μg/mL)+ CORT(50 nmol/L)+Bio A(5 μmol/L)组,除对照组外,各组先加入CORT(50 nmol/L)孵育2 h,然后各组加入相应浓度的LPS(1 μg/mL)和BioA(5 μmol/L)共同孵育36 h;DCFH-DA探针法测定活性氧(ROS)含量;Western blot法测定炎性细胞因子、5-羟色胺转运体(5-HTT)、糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 (NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白1(Caspase-1)的蛋白表达水平。结果 与CORT(50 nmol/L)组和LPS(1 μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+ LPS(1 μg/mL)组的BV2细胞的活力增加,ROS的含量更高,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达水平增加(P<0.05);与CORT(50 nmol/L)+ LPS(1 μg/mL)组比较,CORT(50 nmol/L)+ LPS(1 μg/mL)+ Bio A(5 μmol/L)组的细胞活力降低,ROS的含量下降,炎性细胞因子、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论 小剂量的CORT预处理可以促进LPS激活BV2细胞;Bio A抑制经CORT预处理后LPS诱导的BV2细胞活化,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活有关。