基金项目: 安徽省自然科学基金项目(编号:2208085MH195)~~
作者:李琪琪;吴翔晖;尤青海;
关键词:活化的蛋白激酶C受体1; 音猬因子信号通路; 肺微血管内皮细胞; 通透性; caveolin-1;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.09.018
〔摘 要〕 目的 探讨活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)屏障功能调控及其与音猬因子(SHH)信号通路的相互作用。方法 体外培养RPMVEC,将RPMVEC随机分为:si-NC组、si-NC+LPS组、siRACK1组、si-RACK1+LPS组、si-RACK1+LPS+Vismodegib组和Vismodegib+SAG组;小干扰RNA(siRNA)技术沉默RPMVEC的RACK1,并给予LPS(10 mg/L)、SHH信号通路抑制剂(Vismodegib)(20μmol/L)和SHH信号通路激动剂(SAG)(1μmol/L)处理细胞。干预结束后,免疫荧光法检测RPMVEC中RACK1及小窝蛋白(caveolin-1)表达; Transwell法检测跨内皮细胞电阻(TEER);免疫印迹试验检测各组RACK1、胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(Gli-1)和caveolin-1蛋白表达水平。结果 沉默RACK1可使LPS诱导RPMVEC的TEER值升高(P