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STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响

安徽医科大学学报 2025, 09, v.60 1670-1681     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:81703015)~~

作者:王新平;王林宽;胡鹏超;石义华;

关键词:人骨肉瘤细胞; 铁死亡; 顺铂; 耐药; STAT3蛋白; p-STAT3蛋白;

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.09.014

〔摘 要〕 目的 探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法 以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer1)(10μmol/L)单独或联合处理。使用CCK-8法和细胞克隆形成实验测定不同处理组细胞活力与增殖能力;细胞划痕实验测定细胞的迁移能力;采用试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、细胞内亚铁离子含量、细胞内线粒体的膜电位和功能状态、丙二醛(MDA)水平和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;实时荧光定量PCR(RTq PCR)检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平;通过Western blot检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)及信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白的表达。结果 顺铂单独处理后HOS细胞活力、线粒体膜电位及GSH/GSSG比值下降(P