基金项目: 青海省自然科学基金项目(编号:2022-ZJ-968Q)~~
作者:黄永;马建文;李玉;景青玲;张钦;李长帅;
关键词:萎缩性骨不连; 骨形态发生蛋白-2; 骨髓间充质干细胞; 纳米羟基磷灰石/聚酰胺66; 腺病毒; 骨支架材料;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.09.005
〔摘 要〕 目的 探究骨形态发生蛋白(BMP)-2基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合纳米羟基磷灰石(n HA)/聚酰胺66(PA66)对大鼠股骨骨不连的治疗作用。方法 分离大鼠BMSCs,并分为支架(sent)+BMSCs组、sent+BMSCs+rh BMP-2组、sent+BMSCs+Ad-BMP-2组;将人重组BMP-2(rh BMP-2)或腺病毒感染BMP-2(Ad-BMP-2)载体转染BMSCs并装载n HA/PA66支架材料。流式细胞仪检测BMSCs表达特定表面标志物,通过MTT法检测细胞增殖情况,ELISA检测相关生物活性因子,包括血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、骨钙素(OCN)、骨连接蛋白(ON),碱性磷酸酶(ALP)。扫描电子显微镜(SEM)观察细胞生长和黏附情况。在SD大鼠的萎缩性骨不连模型中,将sent+BMSCs+rh BMP-2或sent+BMSCs+Ad-BMP-2复合体植入缺损区域,分为rh BMP-2组及Ad-BMP-2组,并通过X射线和MicroCT评估治疗效果。结果 n HA/PA66支架表面光滑且多孔,BMSCs良好黏附。流式细胞术显示在BMSCs中高表达CD29和CD90,低表达CD45和CD34。MTT显示细胞在72 h后迅速增殖。与sent+BMSCs组及sent+BMSCs+rhBMP-2组相比,sent+BMSCs+Ad-BMP-2组ALP活性、PDGF、TGF-β、VEGF、FGF、OCN、ON表达均上调(P