〔摘　要〕 目的 构建C-C趋化因子受体6（CCR6）基因纯合敲除小鼠模型，为后续开展体内功能研究奠定关键的动物模型基础。方法 采用规律成簇间隔短回文重复序列及其关联蛋白9系统（CRISPR/Cas9）技术构建Ccr6^-/-小鼠。提取鼠尾基因组DNA，通过PCR并结合琼脂糖凝胶电泳进行小鼠基因型鉴定；应用HE染色观察小鼠的心脏、肝脏、肺及肾脏等主要组织器官的病理学形态；利用Western blot检测小鼠血液、脾脏和骨髓中CCR6蛋白的表达水平；通过流式细胞术检测小鼠脾脏中T细胞和巨噬细胞的比例，以分析CCR6基因敲除对主要免疫细胞群体比例的影响。结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示，经引物鉴定，仅在307 bp位置扩增出单一特异性条带的小鼠即为Ccr6^-/-小鼠；HE染色观察显示，Ccr6^+/+小鼠与Ccr6^-/-小鼠主要组织器官的细胞形态未见明显差异；Western blot分析表明，Ccr6^-/-小鼠主要组织中CCR6蛋白表达基本缺失，敲除效果良好；流式细胞术分析结果表明，CCR6基因缺失可显著增加CD8⁺T细胞的比例，而CD4⁺T细胞和巨噬细胞的比例保持不变。结论 成功利用CRISPR/Cas9技术构建了CCR6基因纯合敲除小鼠模型，为深入开展CCR6的体内功能机制研究提供了稳定可靠的动物模型基础。