〔摘　要〕 目的 本研究通过人工模拟的干燥环境（空气湿度<30%）联合皮下注射氢溴酸东莨菪碱诱导混合型干眼症（DED）小鼠模型，并探究维生素B₁₂滴眼液如何调控DED小鼠角膜基质金属蛋白酶9（MMP-9）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达水平。方法C57BL/6雌鼠50只，10只小鼠为A组（空白组），其余40只小鼠采用干燥环境（空气湿度<30%）联合皮下注射氢溴酸东莨菪碱诱导DED小鼠模型，分别对所有小鼠进行基础泪液分泌实验（SIT）、泪膜破裂时间（TBUT）和角膜荧光素染色评分（CFS）检测，最终选择符合造模标准的小鼠入组，并随机分为B组（模型组）、C组（PBS组）、D组(维生素B₁₂组)，药物处理第0、7、14、21天对各组小鼠进行TBUT、SIT、CFS及角膜炎症程度的评估，从宏观角度分析维生素B₁₂滴眼液治疗DED的疗效。药物处理21 d后，采用颈椎脱臼法处死所有小鼠并取角膜组织，进行HE染色观察各组小鼠角膜组织的形态学变化，ELISA法和免疫组织化学染色检测各组小鼠角膜组织中MMP-9及TNF-α的表达水平。结果 干燥环境（空气湿度<30%）联合皮下注射氢溴酸东莨菪碱诱导DED小鼠的DED相关指标的变化：SIT显著减少、TBUT显著缩短、角膜荧光素点染增加及CFS均显著升高（P<0.05），表明DED模型成功建立，共30只DED小鼠入组。DED模型建立成功且未进行药物干预时，B组、C组、D组之间TBUT、SIT、角膜荧光素点染情况及CFS差异均无统计学意义；B组、C组、D组分别与A组比较，SIT减少、TBUT缩短、角膜荧光素点染明显和CFS均增加，且各项指标的差异均有统计学意义（P<0.05）。药物干预后，D组(维生素B₁₂组)各项指标分别与B组、C组比较：SIT明显增加、TBUT显著延长、角膜荧光素点染减少，角膜较前清亮，荧光素点染减少，CFS降低，且差异均有统计学意义（P<0.05）。ELISA和免疫组织化学染色结果均显示，与A组相比，B组和C组角膜组织中MMP-9和TNF-α的表达量均显著升高（P<0.05）;D组角膜组织中MMP-9和TNF-α的表达量较B组和C组均有所下降，但仍较A组高（P<0.05）。结论 MMP-9及TNF-α两种炎症因子均参与DED的发生发展。维生素B₁₂滴眼液可能通过促进角膜上皮修复改善眼表不适症状。维生素B₁₂滴眼液可能通过降低小鼠角膜组织中MMP-9及TNF-α的表达，增加泪液分泌量，延长泪膜破裂时间，减少角膜荧光素点染，减轻角膜炎症反应，从而达到治疗DED的目的。