基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:91854120);安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2023zhyx-B16);
作者:刘威;孙志阳;曹新旺
关键词:异麦角甾苷;呼吸道合胞病毒;包涵体;F蛋白;M蛋白;炎性因子;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 探究异麦角甾苷对呼吸道合胞病毒(RSV)复制过程的影响及其作用机制。方法 用RSV感染HEp-2细胞(对照组),再用异麦角甾苷处理RSV感染的细胞(异麦角甾苷处理组)。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分析2组中RSV 融合蛋白(F)基因和基质蛋白(M)基因 mRNA水平的差异;运用病毒空斑实验测定2组病毒滴度,以评估异麦角甾苷对病毒复制的抑制作用;利用细胞转染和激光共聚焦成像实验测定形成的RSV包涵体数量,以评估异麦角甾苷在RSV复制必需的包涵体形成过程中的作用。选取18只7周龄BALB/c雌鼠,随机分为3组:未感染RSV的对照组(n=6)、RSV感染组(n=6)以及RSV感染后给予异麦角甾苷治疗组(n=6)。感染后第5天处死小鼠,取肺组织进行病理学分析,以评估异麦角甾苷对RSV感染所致小鼠肺组织损伤的疗效。结果 与对照组相比,异麦角甾苷处理组RSV F基因(t=17.13, P<0.001)和M基因(t=18.22, P<0.001)mRNA水平降低,病毒滴度(t=15.32, P<0.001)下降,RSV包涵体数量降低(t=16.12, P<0.001)。在RSV感染小鼠实验中,与RSV感染组相比,异麦角甾苷处理组小鼠肺部组织中炎症因子IL-4 (t=14.76,P < 0.01)与 IL-6(t=21.13,P<0.001)以及RSV F(t=19.52, P<0.001)与M(t=18.76, P<0.001)基因mRNA水平降低,由RSV感染引起的肺组织病理损伤减轻。结论 异麦角甾苷通过阻碍RSV包涵体的形成抑制RSV复制,减轻了RSV感染诱导的小鼠肺组织损伤。