• 《中文核心期刊要目总览》收录期刊
  • 《科技期刊世界影响力指数(WJCI)报告》入选期刊        
  • 美国《化学文摘(网络版)》收录期刊        
  • 美国《剑桥科学文摘社生命科学文摘数据库》收录期刊
  • 美国《剑桥科学文摘社ProQeust数据库》收录期刊
  • 《全球公共卫生数据库》收录期刊
  • 《日本科学技术振兴机构数据库2024》收录期刊
  • 安徽省“精品栏目”期刊(2022年)       
  • 中国高校科技期刊建设示范案例库优秀科技期刊(2022年)
  • 安徽省“十佳科技期刊” (2023年)

TNF-α调控的circWBSCR22通过miR-512-5p/FAM60A轴对宫颈癌细胞迁移、侵袭的影响

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82300944); 天津市医学重点学科建设资助项目(编号:TJYXZDXK-3-003A); 天津医科大学肿瘤医院院级科学研究资助基金项目(编号:Y1905);

作者:白丽丽;张瑾;樊亚童;张鹏宇

关键词:宫颈癌;TNF-α;circWBSCR22;miR-512-5p;FAM60A;迁移;侵袭;

DOI:专辑:医药卫生科技

〔摘 要〕 目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)调控的环状RNA Williams Beuren综合征染色体区域22(circWBSCR22)对宫颈癌细胞恶性行为的影响及机制。方法 TNF-α处理人宫颈癌HeLa细胞。逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测circWBSCR22表达水平。核质RNA分离实验检测circWBSCR22在细胞中定位。分别通过Transwell实验、四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、克隆形成实验检测细胞迁移、细胞侵袭、细胞活性和细胞增殖能力。双荧光素酶报告基因实验验证微小RNA-512-5p (miR-512-5p)与circWBSCR22或序列相似性家族60A (FAM60A)的靶定关系。RT-qPCR检测miR-512-5p和FAM60A RNA水平。Western blot检测FAM60A蛋白水平。结果 相比于Control组,TNF-α处理后HeLa细胞中circWBSCR22表达水平升高(P<0.05)。大约66%的circWBSCR22存在于细胞质中。相比于对照组,转染circWBSCR22后HeLa细胞的迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.01)能力增强,但细胞活性和细胞增殖能力无明显影响(P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示:与共转染circWBSCR22-WT和miR-NC组相比,共转染circWBSCR22-WT和miR-512-5p组相对荧光素活性降低(P<0.01)。与对照组相比,转染circWBSCR22后HeLa细胞中miR-512-5p表达水平降低(P<0.01)。与对照组相比,转染miR-512-5p后宫颈癌HeLa细胞迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.05)能力下降。双荧光素酶报告基因实验显示:与共转染FAM60A 3′-UTR-WT和miR-NC组相比,共转染FAM60A 3′-UTR-WT与miR-512-5p组荧光活性下降(P<0.01)。与对照组相比,转染miR-512-5p后HeLa细胞中FAM60A的RNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)表达水平降低。相比于对照组,转染FAM60A后宫颈癌HeLa细胞迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.01)能力增强。与对照组相比,转染circWBSCR22后,细胞中FAM60A RNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达水平升高。挽救实验结果显示:相比于pcDNA+miR-NC组,pcDNA+miR-512-5p组FAM60A RNA(P<0.01)和蛋白(P<0.001)表达水平降低且迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.05)能力降低;与pcDNA+miR-512-5p组相比,circWBSCR22+miR-512-5p组FAM60A RNA(P<0.01)和蛋白(P<0.001)表达水平升高且迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.05)能力增强。结论 TNF-α通过circWBSCR22/miR-512-5p/FAM60A调控轴促进宫颈癌细胞的迁移和侵袭。