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慢病毒载体上调GADD45α增强伊马替尼耐药株K562IR细胞的药物敏感性

安徽医科大学学报 2021 12 v.56 1920-1924     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1808085MH273)

作者:刘雪妮;王超;程艳红;杨鹏;

关键词:慢性粒细胞白血病;;K562;;GADD45α;;伊马替尼;;耐药性

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.12.014

〔摘 要〕 目的 探讨通过慢病毒载体上调GADD45α基因对伊马替尼(IM)耐药株K562IR细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。方法培养K562细胞及伊马替尼耐药细胞K562IR,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和Western blot法检测K562和K562IR细胞中GADD45αmRNA和蛋白的表达水平;采用过表达GADD45α的慢病毒载体及对照载体转染于K562IR细胞中,分别为Lv-GADD45α和Lv-NC,通过Western blot检测上调后各组细胞GADD45α蛋白表达水平,并进一步用CCK-8法、Tanswell法和Annexin V-FITC/PI双染法检测转染后细胞增殖、迁移和凋亡的变化。结果K562IR细胞中的GADD45α蛋白和mRNA表达水平低于K562细胞,GADD45α基因转染后,Lv-GADD45α组细胞中的GADD45α蛋白表达水平高于Lv-NC组。Lv-GADD45α组细胞在伊马替尼处理后,IC50值低于Lv-NC组,凋亡率高于Lv-NC组,同时细胞迁移能力也下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过上调伊马替尼耐药株K562IR细胞中GADD45α基因,可以增强慢性髓系白血病细胞K562IR对于伊马替尼的敏感性,抑制白血病细胞的增殖、促进其凋亡。