基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1908085MH284)
作者:李佳;郗玉巧;王少华;杨金亮;杨铁牛;张永亮;胡启飞;
关键词:胶质瘤;;LncRNA MEG3;;增殖;;侵袭;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.04.010
〔摘 要〕 目的应用靶向长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)的过表达重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,从而观察其对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法应用qRT-PCR法检测正常脑组织细胞(N)和胶质瘤细胞系U251中LncRNA MEG3 mRNA的表达情况。构建pCI-MEG3真核过表达载体,转染体外培养的人脑胶质瘤细胞系U251,作为pCI-MEG3过表达质粒组(pCI-MEG3组);空pCI质粒转染体外培养的人脑胶质瘤细胞系U251,作为空载体pCI组(pCI组);无质粒转染的人脑胶质瘤细胞系U251,作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR分析LncRNA MEG3基因表达变化,Western blot法分析LncRNA MEG3相关蛋白MDM2和p53表达变化,MTT法和细胞克隆技术分析胶质瘤细胞增殖能力,Transwell技术分析胶质瘤细胞侵袭能力,流式细胞技术分析胶质瘤细胞凋亡率。结果与正常脑组织细胞比较,胶质瘤细胞中LncRNA MEG3 mRNA表达水平降低。体外实验显示,与Control组和pCI组比较,pCI-MEG3组LncRNA MEG3 mRNA及p53蛋白表达水平均有上调(P<0.05),MDM2蛋白表达下调(P<0.05),细胞增殖能力受到抑制(P<0.01),细胞侵袭能力也受到抑制(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01)。结论人脑胶质瘤细胞中LncRNA MEG3的表达水平低于正常人脑组织细胞,靶向LncRNA MEG3基因的过表达重组质粒能够增加人脑胶质瘤细胞内LncRNA MEG3的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,同时增加其凋亡率。