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体外siRNA-Nav1.5干扰口腔鳞癌HSC-3细胞生物学行为研究

安徽医科大学学报 2019 08 v.54 1227-1232     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1508085MH187)

作者:戴永铮;钱成炜;徐小立;蒋勇;

关键词:口腔鳞状细胞癌;;电压门控钠离子通道;;Nav1.5;;侵袭;;增殖

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.08.012

〔摘 要〕 目的 探究电压门控钠离子通道(VGSC)亚型Nav1.5在口腔鳞癌细胞系和组织中的表达及小干扰RNA(siRNA)转染对HSC-3口腔鳞癌细胞的生物学行为的影响,并进一步分析其可能机制。方法 选取临床口腔鳞癌组织和正常口腔上皮组织免疫组化染色显示Nav1.5在组织中的表达。免疫荧光激光共聚焦显示细胞内Nav1.5的表达。利用脂质体转染siRNA-Nav1.5干扰HSC-3细胞中Nav1.5的表达水平,CCK8和Transwell侵袭实验检测转染后细胞的增殖和侵袭能力。实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot验证与细胞增殖侵袭相关的蛋白:细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9表达变化。结果 免疫组化结果可见在口腔鳞癌组织中Nav1.5阳性表达,正常组织中未见明显表达。免疫荧光结果可见HSC-3细胞中Nav1.5阳性表达。转染siRNA-Nav1.5明显降低HSC-3细胞的增殖和侵袭能力。转染siRNA-Nav1.5的HSC-3细胞PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低。结论 Nav1.5可通过调控PCNA、MMP-2和MMP-9的表达促进口腔鳞癌细胞的增殖和侵袭能力。