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免疫共沉淀联合质谱分析筛选克罗恩病中Intelectin-1相互作用蛋白的初步研究

安徽医科大学学报 2017 04 v.52 519-523     字体:

基金项目: 安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目(编号:gxyqZD2016051)

作者:顾问;周郑;吴文涌;刘晓昌;余昌俊;

关键词:克罗恩病;;Intelectin-1;;免疫共沉淀;;质谱;;蛋白质相互作用

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.04.012

〔摘 要〕 目的对比克罗恩病患者的病变与正常肠黏膜,筛选与肠凝集素-1(Intelectin-1)相互作用的差异蛋白,探讨Intelectin-1及其相互作用蛋白在克罗恩病发展中的作用。方法利用免疫共沉淀技术筛选克罗恩病患者病变及正常组织中与Intelectin-1相互作用的蛋白;利用MALDI-TOF/TOFMS质谱分析技术鉴定与Intelectin-1相互作用蛋白;并使用免疫共沉淀和Western blot分析技术验证所鉴定的Intelectin-1相互作用蛋白。结果利用免疫共沉淀联合质谱分析技术成功筛选出4个与Intelectin-1相互作用差异蛋白,包括:肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)、腺苷酸三磷酸酶(ATPase)、热休克蛋白90(HSP90)、锌指蛋白(ZNF)。结论Intelectin-1可能通过与TRAF3、ATPase、HSP90、ZNF蛋白相互作用,而影响克罗恩病的发展。