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干扰RNA沉默tpd52基因对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

安徽医科大学学报 2017 04 v.52 514-518     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81271391)

作者:秦浩;高兵兵;孙移坤;张昊驹;刘晨;侯江雷;黄佛宝;罗丹;戴宜武;

关键词:胶质瘤;;tpd52;;细胞增殖;;细胞凋亡

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.04.011

〔摘 要〕 目的探究沉默tpd52基因表达后对胶质瘤U87细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法将携带着shRNA-tpd52(抑制tpd52的核苷酸序列)、shRNA-NC(阴性对照的核苷酸序列)的慢病毒体外转染胶质瘤细胞系U87。在转染48 h后荧光显微镜下观察表达GFP细胞数量,采用荧光定量PCR、Western blot分别检测TPD52 mRNA及蛋白表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期分布,Annexin V和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果 U87细胞转染率>90%,与shRNA-NC组及空白对照组相比较,shRNA-tpd52组细胞TPD52 mRNA及蛋白表达量明显减少(P<0.01),而且细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期被阻滞在G0/G1期、细胞凋亡比例明显增加(P<0.05)。结论沉默胶质瘤细胞中tpd52基因表达后,可以有效抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。