基金项目: 国家自然科学基金(编号:82101311);;“早期接触科研”训练计划项目(编号:2022-ZQKY-67);;安徽医科大学校科研基金(编号:2020xkj014)
作者:薛娜娜;徐彩琪;石勇荣;张蕊;孟浅;
关键词:星形胶质细胞;;大脑皮质;;原代培养;;细胞纯化;;胶质纤维酸性蛋白
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.05.005
〔摘 要〕 目的 探究并优化新生小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外原代培养方法,为星形胶质细胞的体外培养提供更优解。方法 为优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外培养方法,取新生3 d的C57BL/6J小鼠大脑皮质组织,去除脑膜和血管,经胰酶消化后离心,加入高糖的杜氏改良Eagle培养基(DMEM)吹打形成细胞悬液。进一步通过差速贴壁法、十字交叉手摇法以及恒温振摇法进行纯化,将细胞分别以不同培养密度接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶中,并通过形态学观察,免疫荧光染色等方法对星形胶质细胞进行纯度鉴定。结果 新生小鼠大脑皮质细胞以5×10~6个/瓶密度接种效果好,活性高;纯化过程中使用高糖DMEM培养基联合差速贴壁法、十字交叉手摇法及恒温振摇法,星形胶质细胞纯度可达99%。结论 成功建立并优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞的原代培养方法。