安徽医科大学学报
2016 07 v.51 935-939
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:30872253);;安徽高校省级自然科学研究项目(编号:KJ2012ZD08)
作者:张业婷;钟峰;姚瑶;赵俊;俞海洋;张文昌;陈敬贤;王明丽;
关键词:实时细胞检测技术;;人巨细胞病毒;;增殖
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.07.004
〔摘 要〕 目的采用实时细胞分析(RTCA)系统监测人巨细胞病毒(HCMV)在MRC-5细胞株上的复制增殖过程,评价此方法在动态监测病毒增殖中的应用价值。方法应用RTCA动态观察MRC-5细胞在不同阶段的生长指数(CI),选择合适的细胞浓度进行HCMV增殖的研究,同时采用传统的空斑形成试验和间接免疫荧光实验作为该方法学的比较和结果验证。结果选择MRC-5最适细胞浓度为0.5×105个/孔;与空斑试验及免疫荧光结果比较,半数细胞指数CI值对应时间(CIT50)与病毒初始滴度有良好的线性关系;同时CI值与病毒滴度随着时间的持续,显示出明显的负相关性(r=-0.977,P<0.05)。结论 RTCA技术可实时监测记录细胞生长状态,反应细胞贴壁、伸展,同时能实时定量监测HCMV增殖复制状况,数据客观可靠,为今后基础实验研究提供了新的实验技术和方法。