安徽医科大学学报
2015 09 v.50 1347-1351
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:81171606);;安徽省临床检测技术公共服务平台(编号:PT20081011)
作者：王晓玮;程筱雯;张焰;徐东芳;王东萍;韦薇;王庆;徐元宏;
关键词：结核病诊断;;γ-干扰素;;ELISPOT;;CFP10;;ESAT6
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.09.035
〔摘 要〕 以结核分枝杆菌CFP10、ESAT6蛋白原核表达、纯化体系为基础,建立稳定的ELISPOT方法;检测164份疑似结核患者标本的外周血ELISPOT,与临床诊断及T-SPOT·TB结果对比。表达所得重组蛋白浓度和纯度如下:CFP10为0.5 mg/ml,84%;ESAT6为4 mg/ml,98%。ELISPOT方法最佳实验条件为每孔细胞密度2×105/孔,CFP10、ESAT6蛋白抗原浓度分别为10μg/孔,细胞孵育时间20 h。ELISPOT的灵敏度与特异度分别为88.50%、82.35%,检测结果与TSPOT·TB方法结果一致(χ2=0.57)。