〔摘　要〕 目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx(pEGFP-N1-HBx)真核表达质粒,并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法以HBV Dimer为模板,PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx。将该质粒转染肝胚瘤细胞株HepG2,以RT-PCR法及荧光显微镜观察其表达情况,再通过基因共转染等技术研究HBx蛋白对HBV复制的影响。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR法检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx质粒在HepG2细胞中能够表达;质粒pEGFP-N1-HBx与pHBV48-X0共转染后,HepG2细胞上清液HBV-DNA、HBsAg和HBeAg分泌显著增多。结论 HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功;HBx蛋白能够促进HBV复制及抗原分泌。